Aislamiento de metapneumovirus humano (HMPV) a partir de muestras clínicas
DOI:
https://doi.org/10.18270/rsb.v5i1.178Palabras clave:
Infección respiratoria aguda, Aislamiento Viral, Tripsina, Inmunofluorescencia, RT-PCRResumen
Objetivo: El objetivo de este trabajo fue establecer una metodología para el aislamiento de una cepa de hMPV a partir de hisopados nasales provenientes de pacientes con sintomatología de enfermedad respiratoria aguda.Materiales y métodos: A partir de 12 muestras positivas por fluorescencia para hMPV, se hizo la inoculación en células LLCMK2 (epiteliales de riñón de mono Rhesus) con un medio de mantenimiento que contenía tripsina como proteasa. Se evaluó el efecto citopático diario por 10 días y se tomaron células infectadas que se utilizaron para la prueba de fluorescencia y para confirmar la infección. Se utilizó RT-PCR para corroborar la presencia del virus.
Resultados: En 8 de las 12 muestras procesadas, se logró aislar el hMPV, confirmándose la infección por fluorescencia y RT-PCR
Conclusiones: A pesar de ser un virus de crecimiento lento y difícil de aislar según los reportes, en este trabajo se logró aislar el hMPV a partir de muestras clínicas frescas, lo cual resulta de gran utilidad en futuros estudios sobre la patogénesis de la infección respiratoria
Descargas
Referencias bibliográficas
Bernal L, Barbosa J, Castellanos JE. El metapneumovirus humano, una amenaza adicional para los niños. Innovación y Ciencia. 2013;20:40-7.
Eggleston H, Gunville C, Miller J, Sontag M, Mourani P. A comparison of characteristics and outcomes in severe human metapneumovirus and respiratory syncytial virus infections in children treated in an intensive care unit. Pediatr Infect Dis J. 2013;32:1330-4.
van den Hoogen B, De Jong J, Groen J, Kuiken T, Groot R, Fouchier R, et al. A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease. Nat Med. 2001;7:719-24.
Griffin DE. Alphaviruses. En: Fields Virology. Knipe DM, Howley P. Eds. 6th Ed. Lippincott Williams & Wilkins; 2013. pp 651-686
van den Hoogen B, Bestebroer T, Osterhaus A, Fouchier R. Analysis of the genomic sequence of a human metapneumovirus. Virology. 2002;295:119-32.
Feuillet F, Lina B, Rosa-Calatrava M, Boivin G. Ten years of human metapneumovirus research. J Clin Virol. 2012;53:97-105.
Haas L, Thijsen S, Elden L, Heemstra K. Human metapneumovirus in adults. Viruses. 2013;5: 87-110.
Døllner H, Risnes K, Radtke A, Nordbø S. Outbreak of human metapneumovirus infection in Norwegian children. Pediatr Infect Dis J. 2004;23:436-40.
Abiko C, Mizuta K, Itagaki T, Katsushima N, Ito S, Matsuzaki Y, et al. Outbreak of human metapneumovirus detected by use of the Vero E6 cell line in isolates collected in Yamagata, Japan, in 2004 and 2005. J Clin Microbiol. 2007;45:1912-9.
Boivin G, Abed Y, Pelletier G, Ruel L, Moisan D, Cote S, et al. Virological features and clinical manifestations associated with human metapFotoneumovirus: A new paramyxovirus responsible for acute respiratory-tract infections in all age groups. J Infect Dis. 2002;186:1330-4.
Boivin G, De Serres G, Côté S, Gilca R, Abed Y, Rochette L, et al. Human metapneumovirus infections in hospitalized children. Emerg Infect Dis. 2003;9:634-40.
Chan P, Tam J, Lam C, Chan E, Wu A, Li C, et al. Human metapneumovirus detection in patients with severe acute respiratory syndrome. Emerg Infect Dis. 2003;9:1058-63.
Espinal D, Hurtado I, Arango A, García J, Laguna-Torres V, Jaramillo S. Metapneumovirus humano en niños: primeros casos en Colombia. Biomédica. 2012;32:174-8.
Barbosa J, Pulido P, Rey- Benito G, Méndez J, Castellanos J, Páez A. Human respiratory syncytial virus and metapneumovirus in patients with acute respiratory infection in Colombia, 2000–2011. Rev Panam Salud Pública. 2014;36:101-9.
Maertzdorf J, Wang C, Brown J, Quinto J, Chu M, De Graaf M, et al. Real-time reverse transcriptase PCR assay for detection of human metapneumoviruses from all known genetic lineages. J Clin Microbiol . 2004;42:981-6.
Herfst S, Mas V, Ver L, Wierda R, Osterhaus A, Fouchier R. Low-pH- induced membrane fusion mediated by human metapneumovirus F protein is a rare, strain-dependent phenomenon. J Virol . 2008;82:8891-5.
Williams J, Harris P, Tollefson S, Halburnt-Rush L, Pingsterhaus J, Edwards K, et al. Human metapneumovirus and lower respiratory tract disease in otherwise healthy infants and children. N Engl J Med. 2004;350:443-50.
Descargas
Publicado
Cómo citar
Número
Sección
Licencia
El (Los) autor(es) certifican que es(son) el (los) autor(es) originario(s) del trabajo que se esta presentando para posible publicación en la Revista Salud Bosque de la Facultad Escuela Colombiana de Medicina de la Universidad El Bosque, puesto que sus contenidos son producto de su directa contribución intelectual.
Todos los datos y las referencias a materiales ya publicados deben estar debidamente identificados con su respectivo crédito e incluidos en las notas bibliográficas y en las citas que se destacan como tal y, en los casos que así lo requieran, deben contar con las debidas autorizaciones de quienes poseen los derechos patrimoniales.
El (Los) autor(es) declara(n) que todos los materiales que se presentan están totalmente libres de derecho de autor y, por lo tanto, se hace(n) responsable(s) de cualquier litigio o reclamación relacionada con derechos de propiedad intelectual, exonerando de responsabilidad a la Universidad El Bosque
